DESARROLLO DE TÉCNICAS DE DOWNSTREAM PARA LA OBTENCIÓN A ESCALA DE VECTORES VIRALES RECOMBINANTES

Abstract

Las modernas tecnologías de producción de vacunas de segunda y tercera generación, invo-lucran escalado de cultivo masivo de células animales y métodos de procesos aguas abajo o downstream process. Estos son críticos a la hora de disponer biomoléculas de uso terapéuti-co, no solo en lo referente a su grado de pureza sino también, en lo que atañe a la producti-vidad del proceso de elaboración elegido, para tal producto biológico. Tomando como modelo el desarrollo de vacunas contra el virus de la rabia y, en función de lo expuesto, se propuso el proyecto en cuestión, con el objetivo de poner a punto las condicio-nes necesarias para concentrar un volumen de antígeno viral (en una primera etapa prove-niente de vacunas de segunda generación virus PV BHK y en una segunda vector viral MVA recombinante) y un modelo de escalado de tales condiciones. El método utilizado fue ultrafil-tración tangencial. Posteriormente, se desarrolló un método in vitro de titulación de virus en cultivo celulares. Este proyecto permitió la puesta a punto de una serie de técnicas que aún no se habían apli-cado en los protocolos de rutina de elaboración de vacunas de segunda y tercera generación. El método de concentración mediante ultrafiltración tangencial, ofrece una alternativa satis-factoria en cuanto a su reproducibilidad y escalado. Los ensayos de evaluación in vitro aún deben se ajustados en cuanto a su correlación con los realizados in vivo